STRUCTURE AND FUNCTION OF L-LACTATE DEHYDROGENASES FROM THERMOPHILIC AND MESOPHILIC BACTERIA .1. ISOLATION AND CHARACTERIZATION OF LACTATE-DEHYDROGENASES FROM THERMOPHILIC AND MESOPHILIC BACILLI

Lactat-Dehydrogenasen von thermophilen Bazillen (Bacillus stearothermophilus, Bacillus caldotenax) und von mesophilen Bazillen (Bacillus X1, Bacillus subtilis) wurden mit einem 2-Stufen-Reinigungsverfahren isoliert. Es wurde in jedem Bacillus jeweils nur ein Typ des Enzyms (LDH-P4), bestehend aus 4 identischen Untereinheiten (Mr 34000 bzw. 36000) gefunden. Die tetrameren Enzyme wurden charakterisiert im Hinblick auf die Thermosta-bilität, pH- und Temperaturabhängigkeit der Pyruvat-Reduktion bzw. L-Lactat-Oxydation, SubstratSpezifität, Sättigungs-Kinetik (Km-Wer-te von Pyruvat, Lactat, NAD und NADH), Pyruvat- bzw. Oxamat-Hemmung und Fructosebisphos-phat-Aktivierung. Thermophile und mesophile Lac tat-Dehy drogenasen unterschieden sich in charakteristischer Weise im Hinblick auf diese Parameter. Erste Strukturdaten (AminO&Suml;aure-Zusammenset-zung, vergleichende N-terminale Sequenzanalyse) zeigen die erwartete, phylogenetische Verwandtschaft (ausgeprägte Sequenzhomologie). Es sind aber auch typische Unterschiede zwischen thermophilen und mesophilen Dehydrogenasen vorhanden, eine gute Ausgangslage für weitere vergleichende Untersuchungen. © 1979 Walter de Gruyter & Co.