DESIALYLATION OF GLYCOCONJUGATES USING IMMOBILIZED VIBRIO-CHOLERAE NEURAMINIDASE PREPARATION, PROPERTIES AND USE OF BOUND ENZYME

Vibrio-cholerae-Neuraminidase wurde mit Hilfe der Cyanogenbromid-Methode an Sepharose 4B gebunden. Die Eigenschaften des gebundenen Enzyms ähnelten denen der löslichen Neuraminidase, abgesehen von einer erheblich gesteigerten Stabilität besonders bei 4 °C und einer Verminderung der spezifischen Aktivität mit verschiedenen Substraten. Hinweise wurden erhalten, daß bei der Immobilisierung die Wechselwirkung des Enzyms mit hochmolekularen Substraten verändert wird. Mit Hilfe von Fetuin als Modellsubstrat wurden optimale Bedingungen zur partiellen bzw. vollständigen Desiaiylierung von Glykokonjugaten in einem geschlossenen System ausgearbeitet, bei dem das immobilisierte Enzym die stationäre und das gelöste Substrat die mobile Phase bildet. Abgespaltene Neuraminsäure wurde wegen ihrer Inhibitoreigenschaft kontinuierlich ausdialysiert. Das gebundene Enzym eignet sich zu wiederholtem Gebrauch. Die Anwendung der immobilisierten Neuraminidase zur Desiaiylierung von Zellen wird beschrieben. © by Walter de Gruyter & Co.