ENZYMIC CHARACTERIZATION OF RABBIT BLASTOCYST PROTEINASE WITH SYNTHETIC SUBSTRATES OF TRYPSIN-LIKE ENZYMES

Nachdem frühere experimentelle Untersuchungen gezeigt haben, daβ gewisse Proteinasen des Trophoblasten eine wichtige Rolle bei der Einleitung der Implantation des Embryos im Uterus spielen, gelang nun eine vorlüufige enzymatische Charakterisierung der in Extrakten aus Kaninchenblastozysten gefundenen Endopeptidaseaktivitüt. Neu entwickelte Tripeptid-pnitroanilid- Substrate ermöglichten erstmalig quantitative Bestimmungen der Enzymaktivitüten in diesem Material. Synthetische Substrate mit nur einer Aminosäure werden nicht in messbaren Raten hydrolysiert. Die relativen Hydrolyseraten der Tripeptidsubstrate zeigen eine bevorzugte Bindung von Substraten mit hydrophoben oder Thrombin-bevorzugten Aminosäureresten in Position P2 und/oder P3 an das aktive Zentrum der Blastozystenproteinase(n). Das pH-Optimum der Spaltung wurde bei 8.5 gefunden. Titrationsexperimente mit Proteinaseinhibitoren ergaben eine besonders starke Hemmung der Spaltungsaktivitüt durch Aprotinin (Trasylol). Aus Substratspezifitüt und Hemmspektrum ist zu schlieüen, daβ das aktive Zentrum der Blastozystenproteinase(n) dem des Trypsins eng verwandt ist, jedoch ist die Substratspezifitüt hüher. Die gefundenen enzymatischen Eigenschaften ühneln sowohl denen von Drüsen-Kallikreinen als auch denen des Spermienenzyms Akrosin. Die Müglichkeit, daβ beide Enzymtypen im untersuchten Material vorkommen, sowie ihre Beziehung zu der früher beschriebenen gelatinolytischen Proteinase werden diskutiert. © 1979 Walter de Gruyter