RNA干扰基因敲除MAGE-1在恶性胶质瘤U87细胞中的初步研究

被引：5

作者：

程光 ^{[1
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章翔 ^{[1
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鲍炜 ^{[2
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张赟 ^{[2
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张新海 ^{[2
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曹卫东 ^{[1
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高大宽 ^{[1
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宋蕾 ^{[1
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机构：

[1] 第四军医大学西京医院解放军神经外科研究所

[2] 第四军医大学西京医院免疫教研室

来源：

医学研究生学报 | 2006年 / 04期

关键词：

pSUPER; 短片段双链核糖核酸; 核糖核酸干扰; MAGE-1; 胶质瘤;

D O I：

暂无

中图分类号：

R739.4 [神经系肿瘤];

学科分类号：

100214 ;

摘要：

目的:通过构建抑制MAGE-1的短片段双链核糖核酸(siRNA)表达载体,鉴定其在人恶性胶质瘤细胞U87细胞中对MAGE1基因表达的干涉作用。方法:化学合成2对编码短发夹RNA序列的靶向MAGE1基因核苷酸链,克隆至经BglⅡ、HindⅢ双酶切的pSUPER载体上,重组构建核糖核酸干扰(RNAi)质粒载体。利RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜,检测经稳定转染后胶质瘤U87细胞中MAGE-1的表达,以了解siRNA的干效果。结果:重组构建的pSUPERMAGE1载体经双酶切、电泳及插入基因片段序列分析,表明寡核苷酸链成地插入至预计位点,且序列与预期完全一致。稳定转染后G418筛选出的U87多克隆细胞MAGE-1的表达RTPCR、流式细胞术和荧光显微镜检测,2对siRNA均有较明显的干扰作用。结论:载体的成功构建并能对U细胞中的MAGE1分子进行RNAi,为进一步研究MAGE1在肿瘤中的作用,分析基因功能,展开肿瘤基因治疗奠了基础。

引用

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页数：7