构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞

被引：2

作者：

乔庆 ^{[1
]}

陈勇 ^{[2
]}

窦科峰 ^{[2
]}

张静 ^{[3
]}

李剑平 ^{[2
]}

机构：

[1] 第四军医大学唐都医院普通外科

[2] 第四军医大学西京医院肝胆外科

[3] 第四军医大学西京医院病理科

来源：

医学研究生学报 | 2006年 / 04期

关键词：

补体衰变加速因子; 壳聚糖; 纳米微粒; 基因克隆; 基因转染;

D O I：

暂无

中图分类号：

R392 [医学免疫学];

学科分类号：

100102 ;

摘要：

目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。

引用

页码：302 / 305+398 +398

页数：5