人高迁移率族蛋白1诱导血管内皮细胞肿瘤坏死因子α的分泌规律

目的 :探讨人高迁移率族蛋白 1(HMGB1)诱导血管内皮细胞肿瘤坏死因子α(TNF α)的分泌规律及其在脓毒症中的作用。　方法 :HMGB1的剂量效应组分别用含有 0、0 .1mg/L、1.0mg/L、10mg/L、2 0mg/L、5 0mg/LHMGB1的培养液与人脐静脉内皮细胞株ECV 30 4共培养 10h ,分别收取HMGB1刺激孔及对照孔细胞和培养液上清 ,用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF α含量 ,采用流式细胞技术观察HMGB1诱导血管内皮细胞的凋亡情况。人HMGB1的时间效应组以含有 2 0mg/LHMG1的培养液、阳性对照组以含有 10 0mg/L脂多糖 (LPS)的培养液、阴性对照组以不含HMGB1的培养液分别培养EVC 30 4细胞 0、2、4、6、8、10、12和 2 4h ,同上留取离心后的培养液上清用双抗体夹心ELISA法测其上清中的TNF α含量。　结果 :将HMGB1加入到血管内皮细胞培养液中能明显刺激其TNF α的分泌。在 0 .1～ 5 0mg/L范围内 ,HMGB1诱导EVC 30 4的TNF α分泌增加 ,呈明显的剂量依赖性关系 ;HMGB1组EVC 30 4的TNF α分泌在 0～ 2 4h间呈时间依赖性关系 ;5 0mg/LHMGB1能明显诱导EVC 30 4细胞凋亡。　结论 :人HMGB1能诱导血管内皮细胞TNF α的分泌与凋亡 ,证实HMGB1在脓毒症的发生、发展中发挥作用。