有效去除农杆菌和籼稻转化系统优化

被引:11
作者
曾千春
李旭刚
马炳田
陈松彪
徐鸿林
孟昆
魏晓丽
朱祯
机构
[1] 中国科学院遗传与发育生物学研究所
[2] 中国科学院遗传与发育生物学研究所 北京
[3] 云南农业大学农业生物多样性应用技术国家工程研究中心
[4] 昆明
[5] 北京
关键词
农杆菌; 潮霉素磷酸转移酶基因; sck基因; 籼稻; 明恢86;
D O I
暂无
中图分类号
S511.21 [];
学科分类号
0901 ;
摘要
为了提高根农杆菌籼稻转化效率 ,将修饰的豇豆胰蛋白酶抑制剂基因sck和潮霉素磷酸转移酶基因hpt分别置于紧密相连的 2个T -DNA上 ,构建载体 pCDMARUSCK -HPT ,电激法将表达载体转化农杆菌LBA4 40 4获得工程菌。比较了提门叮和国产噻孢霉素对工程菌LBA4 40 4的抑制效果 ,试验得出提门叮在 5 0 0mg/L以内比噻孢霉素能更有效地去除水稻细胞中的农杆菌 ,而且低浓度条件下 (2 5 0mg/L)就能有效地抑制工程菌LBA4 40 4 ,并且有利于水稻转化细胞成功地再生植株。确立了工程菌LBA4 40 4菌液浓度OD值 0 8,浸染时间 5min为明恢 86合适的转化参数。在此基础上 ,采用优化的农杆菌介导法转化杂交籼稻优良恢复系明恢 86 ,获得转基因植株 12 7个克隆 ,转化效率 4 5 %。
引用
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页数:8
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遗传学报, 2002, (06) :519-524
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