冬凌草甲素诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其机制

被引:22
作者
李娜 [1 ]
金平 [2 ]
张春洁 [1 ]
机构
[1] 兰州大学第一临床医学院妇产科
[2] 深圳市妇幼保健院妇产科
关键词
冬凌草甲素; 卵巢肿瘤; 细胞凋亡; bcl-2; bax; survivin;
D O I
暂无
中图分类号
R737.31 [卵巢肿瘤]; R285.5 [中药实验药理];
学科分类号
100214 [肿瘤学]; 100806 [中药药理学];
摘要
目的观察中药冬凌草的有效提取成分冬凌草甲素对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖抑制及诱导凋亡作用,并探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察冬凌草甲素单药及冬凌草甲素联合顺铂对SKOV3细胞的增殖抑制情况;倒置显微镜和透射电子显微镜观察SKOV3细胞形态学和超微结构的改变;流式细胞术PI单染检测冬凌草甲素对细胞周期的影响;流式细胞术AnnexinV-FITC/PI双染检测冬凌草甲素对细胞凋亡的影响;实时荧光定量聚合酶连反应(QRT-PCP)检测SKOV3细胞bcl-2、bax、sur-vivin mRNA的表达水平。结果 (1)MTT结果显示冬凌草甲素对卵巢癌SKOV3细胞的增殖具有明显的抑制作用,且呈时间剂量依赖性,24、48、72h的半数抑制浓度(IC50)分别为45.22、33.85、22.48μmol/L;与顺铂合用具有协同抑制作用。(2)倒置显微镜下可见细胞生长明显受抑制。(3)透射电子显微镜结果显示,冬凌草甲素组出现空泡变性,染色质浓缩,核染色质边集。(4)细胞周期显示冬凌草甲素组细胞周期被阻滞于S期和G2/M期。(5)AnnexinV-FITC/PI双染检测冬凌草甲素(10、20、30μmol/L)作用细胞48h后细胞的凋亡率分别为(9.13±0.91)%、(18.89±1.79)%、(36.11±3.01)%,明显高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)QRT-PCR显示冬凌草甲素组bcl-2、survivin基因表达下调,bax基因表达上调,与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论冬凌草甲素对人卵巢癌SKOV3细胞具有明显的增殖抑制及诱导凋亡作用;其抗肿瘤机制可能与下调bcl-2、survivin,上调bax的表达有关。
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