IQGAP1在血管紧张素Ⅱ诱导足细胞凋亡中的作用及其机制探讨

目的研究IQ结构域GTP酶活化蛋白1（1Q domain GTPase-activating protein 1,IQGAP1）在血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导足细胞凋亡中的作用以及可能的分子机制。方法体外培养条件永生性小鼠足细胞（MPC）,以不同浓度(0、10-12、10-10、10-8、10-6mol/L)AngⅡ处理MPC或10-8mol/L AngⅡ刺激不同时间（0、1、3、6、12、24 h）,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光、Western印迹法检测IQGAP1的表达及分布。IQGAP1 siRNA转染以及丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）通路（包含p38、JNK和ERK1/2 3条主要通路）抑制剂SB202190（10μmol/L）、SP600125（25μmol/L）或U0126（10μmol//L）预处理MPC后。分别检测MAPK信号蛋白磷酸化水平及细胞凋亡率,并采用免疫共沉淀法研究IQGAPI与ERK1/2结合水平的变化。结果（1）AngⅡ可以诱导足细胞凋亡,且凋亡率随着刺激时间和刺激浓度的增加而进一步增加。（2）正常足细胞IQGAP1主要分布于细胞膜和胞质,随AngⅡ刺激浓度和刺激时间的增加,胞膜和胞质IQGAP1表达逐渐增高,且随剂量和时间增高。（3）SB202190、SP600125或U0126分别预处理足细胞,可显著降低AngⅡ诱导的足细胞凋亡（P<0.05）.但不影响IQGAP1蛋白表达。（4）IQGAP1 siRNA转染足细胞显著下凋ERK1/2磷酸化水平（P<0.05）.降低IQGAP1与ERK1/2结合量（P<0.05）,并抑制AngⅡ诱导的细胞凋亡（P<0.05）,但对于p38以及JNK通路无显著影响。结论IQGAP1通过ERK1/2 MAPK信号通路介导AngⅡ诱导的足细胞凋亡。