谷胱甘肽-S转移酶-中期因子融合蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

被引：1

作者：

郭翔

机构：

[1] 诸暨市人民医院输血科

来源：

中国基层医药 | 2012年 / 06期

关键词：

中期因子; 原核表达; 多克隆抗体;

D O I：

暂无

中图分类号：

R735.2 [胃肿瘤];

学科分类号：

摘要：

目的构建谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和中期因子(MK)融合蛋白的原核表达质粒,并表达和纯化蛋白,制备多克隆抗体。方法通过RT-PCR技术从人胃癌组织中扩增人MK编码序列,克隆入表达载体pGEX-1λT中,获得表达质粒pGEX-MK,并在大肠杆菌BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,通过亲和层析纯化表达的GST-MK融合蛋白,并以重组蛋白免疫兔子。结果成功构建了GST-MK融合蛋白的原核表达载体,经诱导表达纯化得到GST-MK融合蛋白。免疫兔子后取多抗血清以间接ELISA检测效价达1:64 000,Westernblotting分析显示多克隆抗血清对MK蛋白特异结合。结论 MK在大肠杆菌中成功表达及其多克隆抗体的获得,为研究MK生物功能奠定了基础。

引用

页码：841 / 843 +964

共 5 条

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