致泻性大肠埃希氏菌多重PCR检测试剂盒的质量评估

目的考察致泻性大肠埃希氏菌试剂盒对目标菌检测的准确性、特异性、抗干扰性能。方法①致泻性大肠埃希氏菌PCR检测:按照试剂盒说明书进行PCR反应体系配制和PCR程序扩增,对PCR产物采用Qiaxcel Advanced全自动核酸蛋白分析仪进行电泳分离,参照试剂说明书对目标菌评定;②通过对与目标菌生境相似、高频并存的非目标菌的混合模板进行检测,对试剂盒的特异性进行评估;③通过对目标菌和非目标菌的混合模板进行检测,对试剂盒的抗干扰能力进行评估。结果该试剂盒对5种致泻性大肠埃希氏菌的特征基因均能正确扩增;体系中加入目标菌的同时,加入大量的非目标菌,目标片段仍有很好的扩增,除检出目标菌特异条带,无非特异性的条带产生。结论对相应的目标菌都能给出准确的鉴定结果,特异性良好,且生境相似高频并存的非目标菌对目标菌的检测不产生干扰。