转金属硫蛋白突变体αα的烟草具有较高的重金属抗性

被引：10

作者：

张晓钰

周慰

茹炳根

机构：

[1] 北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京,北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京,北京大学生命科学学院蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室!北京

来源：

植物学报 | 2000年 / 04期

关键词：

金属硫蛋白; αα突变体; 植物表达载体; 抗性;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q943.2 [植物基因工程];

学科分类号：

摘要：

金属硫蛋白 (MT)有α、β两个结构域 ,其中α结构域优先结合Cd2 + 、Hg2 + ,以α结构域代替 β结构域而得到的αα突变体在大肠杆菌构建及表达后 ,体外实验证明其具有同天然MT相似的稳定性 ,但结合重金属的能力稍强于天然MT。将αα突变体转入植物表达载体 ,以CaMV 35S为启动子 ,利用根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens(SmithetTownsend)Conn)介导的叶盘法转化烟草 (NicotianatabacumL .cv.NC89)。Southern、Western证明了外源基因在烟草内的整合与表达。重金属抗性结果证明 :转αα突变体烟草在含 30 0 μmol/LCdCl2 的培养基中可正常生长 ,转天然MT的烟草在含 2 0 0 μmol/LCdCl2 的培养基中生长 ,而野生型烟草只能在含 75 μmol/LCdCl2 的培养基中生长。Cd2 + 含量及分布实验证明 :转基因烟草同天然烟草相比 ,根部吸收了大部分的Cd2 + ,从而降低了叶部Cd2 + 含量。

引用

页码：416 / 420

页数：5

共 6 条

[1] Cadmium partitioning in transgenic tobacco plants expressing a mammalian metallothionein gene [J].

de Borne, FD ;

Elmayan, T ;

de Roton, C ;

de Hys, L ;

Tepfer, M .

MOLECULAR BREEDING, 1998, 4 (02) :83-90

[2] Comparison of small-scale methods for the rapid extraction of plant DNA suitable for PCR analysis [J].

Rogers, HJ ;

Burns, NA ;

Parkes, HC .

PLANT MOLECULAR BIOLOGY REPORTER, 1996, 14 (02) :170-183

[3]

Tissue partitioning of cadmium in transgenic tobacco seedlings and field grown plants expressing the mouse metallothionein I gene[J] . Ricky Yeargan,Indu B. Maiti,Mark T. Nielsen,Arthur G. Hunt,George J. Wagner.Transgenic Research . 1992 (6)

[4]

Extraction of DNA from milligram amounts of fresh, herbarium and mummified plant tissues[J] . Scott O. Rogers,Arnold J. Bendich.Plant Molecular Biology . 1985 (2)

[5]

Sambrook,J,Fritsch,EF,Maniatis,T. Molecular Cloning: A laboratory Manual . 1989

[6]

Copper-sensitive mutant of Arabidopsis thaliana. Vliet CV,Andersen CR,Cobbett CS. Plant Physiology . 1995

← 1 →