检测植物DNA扩增多态性方法的比较和改进

被引:24
作者
胡志昂
恽锐
钟敏
董夫贵
王洪新
钱迎倩
机构
[1] 中国科学院植物研究所
[2] 中国科学院植物研究所 北京
[3] 北京
[4] 北京 美国俄亥俄州Miami大学植物学和化学系。Present address:Department of Botany and Chemistry
[5] Miami University
[6] Oxford
[7] Ohio USA
[8] 北京
关键词
随机扩增多态DNA; DNA扩增指纹; 植物自然群体; DNA多样性; 聚丙烯酰胺凝胶电泳; 银染;
D O I
暂无
中图分类号
Q943 [植物细胞遗传学];
学科分类号
071007 ; 090102 ;
摘要
以辽东栎(Quercus liaotungensis Koidz.)、锦鸡儿(Cargagana ssp.)和野大豆(Glycine soja(L.)Sieb.etZucc.)为材料,比较了随机扩增多态DNA(RAPD)和DNA扩增指纹(DAF)方法。用RAPD的琼脂糖胶电泳和溴乙锭染色,RAPD和DAF谱一般不足10条带。用DAF的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和银染,极大地提高了RAPD的灵敏度和分辨率,多达20~40个产物。用3'末端完全相同的引物,RAPD和DAF有同样的扩增谱,说明两种方法有相似的机理。降低胶的浓度可提高RAPD和DAF的分辨率,达40~80条带。琼脂糖电泳分离的溴乙锭显示的单荧光带,用PAGE和银染可分辨出多个片段。分子克隆证实单荧光带的分子量异质性。在用Taq DNA多聚酶的条件下,RAPD和DAF的再现性均良好。
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