R3 cDNA探针的化学发光标记

被引:3
作者
匡永清
姚素臣
赵洪礼
机构
[1] 第四军医大学化学教研室
[2] 第四军医大学微生物学教研室
关键词
化学发光; 异鲁米诺衍生物; 核酸探针;
D O I
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学科分类号
摘要
作者用化学发光物质N-(4-氨基丁基)-N-乙基异鲁米诺(ABEI)与琥珀酸酐反应得ABEI-半琥珀酰亚胺.然后在二环己基碳二亚胺(DCC)存在下,用N-羟基琥珀酰亚胺活化为ABEI-半琥珀酰亚胺活性酯(ABEI-HSAE).同时,在亚硫酸氢钠催化下用乙二胺对核酸探针单链进行化学修饰,引入具有高反应活性的伯胺基.将修饰后的探针与ABEI-HSAE在室温下反应制得了化学发光探针,并用发光测定方法对标记效果进行了检验.以H2O2-K3Fe(CN)6激发化学发光时,检测限为50pg.本实验为进一步利用化学发光法对靶核酸进行定量测定打下了基础.
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[1]  
Novel chemical method for the preparation of nucleic acids for non-isotopic hybridization..Viscidi;RP;Connelly;CJ;Yolken;RH;.J Clin Microbiol.1986,