目的:建立山豆根中黄酮类成分的定性、定量分析方法,完善药材质量控制手段。方法:以HPLC-DAD-ESI-MS方法,对山豆根中黄酮类成分进行在线分离与定性鉴定;以HPLC方法同时测定山豆根药材中5个主要活性黄酮的含量。结果:从山豆根中共鉴定了17个黄酮成分,其中7个成分的保留时间、紫外吸收特征和质谱碎片与对照品一致,分别是三叶豆紫檀苷、槲皮素、芒柄花素、高丽槐素、苦参酮、山豆根酮和山豆根色烯素;另外根据紫外吸收特征和质谱碎片并结合文献数据初步确定了10个成分的化学结构。建立了山豆根中三叶豆紫檀苷、槲皮素、高丽槐素、山豆根酮和山豆根色烯素等5个黄酮类成分的回归方程,线性关系均良好(r>0.999 8),加样回收率为96.40%–104.43%,采用此方法成功检测了17个山豆根样品中上述5种黄酮成分的含量。结论:本文建立的方法可定性、定量分析山豆根中的黄酮类成分,可用于山豆根药材的质量分析。