表达反义bcl-2的重组腺病毒诱导BT325细胞凋亡

被引：3

作者：

王刚

王玉芝

杨安钢

王成济

机构：

[1] 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!陕西西安,军事医学科学院放射医学研究所!北京,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!陕西西安,第四军医大学生物化学与分子生物学教研室!陕西西安

来源：

第四军医大学学报 | 2000年 / 12期

关键词：

bcl-2; 细胞凋亡; 腺病毒载体; 反义RNA; 神经胶质瘤; 基因治疗;

D O I：

暂无

中图分类号：

R73-36 [治疗实验];

学科分类号：

100214 [肿瘤学];

摘要：

目的　构建携带反义 bcl- 2的重组腺病毒并观察其对BT32 5细胞生长和凋亡的影响 .方法　利用细胞内同源重组的方法构建携带反义 bcl- 2的重组腺病毒 ,利用反转录 PCR和免疫组化法检测反义 bcl- 2在细胞内的表达及细胞 Bcl- 2蛋白表达的变化 ,用 MTT法和集落形成试验观察重组腺病毒对细胞生长和集落形成能力的影响 ,用电镜观察、DNA片段化分析和流式细胞仪技术检测细胞的凋亡 .结果　成功构建了携带反义 bcl- 2的重组腺病毒 Ad- abcl- 2 ,滴度达到 6 .5× 10 7nfu· L- 1 ;反转录 PCR表明反义 bcl- 2在 BT32 5细胞内有效转录 ,免疫组化检测到细胞 Bcl- 2蛋白表达水平明显下降 ;重组腺病毒感染 BT32 5细胞可以显著抑制细胞的生长 ,6 d生长抑制率可达 6 6 % ,同时细胞的集落形成能力明显下降 ;用电镜观察、DNA片段化分析和流式细胞仪技术均检测到细胞的凋亡 .结论　重组腺病毒 Ad- abcl- 2可以在细胞中有效表达反义 bcl- 2 ;反义 bcl- 2的表达抑制了 BT32 5细胞内 Bcl- 2蛋白的合成 ;反义 bcl- 2的表达可以显著抑制 BT32 5细胞的生长及其集落形成能力 ;反义 bcl- 2抑制 BT32 5细胞增殖是通过诱导细胞凋亡实现的

引用

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页数：5

共 4 条

[1]

反义bcl-2在胃癌细胞中的诱导表达及促凋亡作用.[J].张杰;彭玮丹;惠宏襄;金明;王多宁;王成济;钱焕文.生物化学与生物物理学报.1999, 03

[2]

反义bcl─2RNA促进HL─60细胞的凋亡 [J].