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中华眼镜蛇毒腺cDNA表达文库的建立和分析
被引：4
作者：
万榕
宋军
林旭
林建银
机构：
[1] 福建医科大学分子医学中心
[2] 福建医科大学分子医学中心 病理学系
[3] 福建福州
来源：
关键词：
中华眼镜蛇;
毒腺;
cDNA表达文库;
PCR;
D O I：
暂无
中图分类号：
Q75 [分子遗传学];
学科分类号：
071007 ;
摘要：
目的 :为研究开发眼镜蛇毒药用基因工程产品 ,筛选克隆及表达相关药用功能基因 ,构建中华眼镜蛇毒腺cDNA表达文库 .方法 :一步法提取总RNA ,Oligo(dT)纤维素层析柱纯化mRNA ,逆转录PCR合成双链cDNA ,分级分离除去小片段后 ,收集大于 5 0 0bp的cDNA片段 ,取 1 0ngcDNA与质粒载体pSPORT1连接、转化 .结果 :获得克隆总数为 2× 1 0 5的眼镜蛇毒腺cDNA表达文库 ,重组率 97% .利用PCR技术从该文库扩增了心脏毒素 3(CTX 3)和磷脂酶A2 (PLA2 )基因的cD NA .通过对文库克隆的序列测定和初步生物信息学分析 ,获得 2 4个中华眼镜蛇毒腺EST序列 .结论 :所建立的毒腺cDNA表达文库质量较高 ,可用于进一步筛选、克隆蛇毒药用功能新基因
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页码：1208 / 1211
页数：4
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