负载hTERT复制缺陷型腺病毒的包装及鉴定

被引:8
作者
陈陵
向国春
李向红
蔡永国
李晶晶
房殿春
罗元辉
李志宏
杨仕明
机构
[1] 第三军医大学西南医院全军消化中心
关键词
人端粒酶逆转录酶; 腺病毒表达载体;
D O I
暂无
中图分类号
R346 [];
学科分类号
摘要
目的:构建负载人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的复制缺陷型腺病毒.方法:将克隆有正义hTERTcDNA的腺病毒穿梭质粒pDC315-hTERT与腺病毒包装质粒pBHGlox-DeltaE1,3Cre共转染人胚肾293细胞(HEK293),包装负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒表达载体(Ad-hTERT).对Ad-hTERT扩增、纯化并浓缩后,进一步行感染性鉴定、电镜鉴定及双引物PCR鉴定.结果:纯化浓缩后的Ad-hTERT滴度可达5×1012pfu/L.电镜下可见在HEK293细胞中形成的病毒颗粒,PCR双引物鉴定Ad-hTERT可扩增出Ad及hTERT特异片段,而对照则不能扩出hTERT片段.结论:成功构建了负载hTERT基因的复制缺陷型腺病毒.
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共 2 条
[1]
Immortalization protocols used in cell culture models of human breast morphogenesis.[J].T. Gudjonsson;R. Villadsen;L. R?nnov-Jessen;O. W. Petersen.Cellular and Molecular Life Sciences.2004, 19
[2]
人端粒酶催化亚单位基因正反义腺病毒表达载体的构建及鉴定 [J].
陈陵 ;
杨仕明 ;
蔡永国 ;
房殿春 ;
罗元辉 .
第四军医大学学报, 2005, (19) :1732-1734