重组人表皮生长因子纳米微球修复糖尿病大鼠溃疡创面

背景:在糖尿病合并有溃疡创面的动物实验中,各种生长因子单药或联合治疗都有报道。但是以纳米微球作为表皮生长因子载体进行糖尿病溃疡愈合的研究作者未检索到。目的:比较重组人表皮生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)纳米微球和rhEGF原液2种不同剂型修复糖尿病大鼠溃疡效果的差异。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-02在卫生部及天津市激素与发育重点实验室完成。材料:rhEGF原液由深圳华生元基因工程有限公司提供[rhEGF含量为1μg(500U)],rhEGF纳米微球[rhEGF含量为1μg(500U)]、空纳米微球由天津医科大学代谢病医院与天津大学材料学院纳米生物技术研究所联合制备,并完成鉴定。方法:88只SD大鼠尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,用打孔器制备糖尿病大鼠溃疡模型。随机分为4组:rhEGF纳米微球组24只给予rhEGF纳米微球,rhEGF原液组24只给予rhEGF原液,空微球组24只给予空微球(与rhEGF纳米微球质量相同),PBS溶媒对照组16只给予PBS。各组均于造模后第1天开始用注射器将溶解好的药物均匀的喷洒在创面,待作用5min后用无菌纱布包扎。第1天给液量为0.12mL,以后根据创面愈合情况逐渐减少给液量。主要观察指标:于3,7,14,21d计算创面愈合率。同时取创面肉芽组织,免疫组织化学染色测增殖核细胞抗原阳性表达情况,透射电镜观察成纤维细胞超微结构改变。结果:从第14天开始,rhEGF纳米微球组创面愈合率、增殖核细胞抗原阳性细胞率高于rhEGF原液组(P<0.05,P<0.01)。透射电镜下可见rhEGF纳米微球组成纤维细胞胞质内有大量的内质网,扩张成池状,腔内充满了合成的胶原蛋白。结论:与rhEGF原液比较,rhEGF纳米微球促进溃疡愈合更快。