雌激素在体外对大鼠成骨细胞的作用

目的:近来研究表明雌激素除抑制骨吸收外,还具有促进成骨的作用。实验拟观察雌激素在体外对大鼠成骨细胞的影响。方法:实验于2007-03在上海复旦大学放射医学研究所骨代谢研究室完成。①实验材料:1日龄SD新生大鼠(红皮鼠)10只,清洁级,体质量约10g左右。雌雄不拘。②实验方法:取大鼠颅盖骨机械分离加酶消化法体外分离培养成骨细胞,取传一代细胞,以1.25×106L-1的密度接种于96孔细胞培养板,培养24h后分为两组,分别为空白对照组和10-8mmol/L雌激素组(加入1×10-8mmol/L雌二醇),继续培养72h。③实验评估:碱性磷酸酶染色鉴定成骨细胞;四甲基偶氮唑盐法检测成骨细胞的增殖能力;PNPP法测定碱性磷酸酶活性。低倍镜下测量矿化结节面积并计算面积比,观察雌二醇对矿化能力的影响。结果:①体外分离培养的成骨细胞碱性磷酸酶染色成阳性。原代培养的细胞纯率超过90%。②与空白对照组相比,10-8mmol/L雌激素组成骨细胞增殖能力及碱性磷酸酶活性显著提高(P<0.01);10-8mmol/L雌激素组单位细胞数碱性磷酸酶活性较空白对照组有上升趋势,但差异无显著性(P>0.05)。③与空白对照组相比,10-8mmol/L雌激素组矿化面积及矿化面积比显著增加(P<0.01)。结论:雌二醇在体外可促进大鼠成骨细胞生长和增殖,提高碱性磷酸酶活性,并促进骨矿化物质在骨内沉积。