人工肝脏体外支持系统的成年猪肝细胞分离和培养(英文)

被引:3
作者
周晓东
刘丽
加野准子
向山俊之
常盘孝义
机构
[1] 日本通商产业省工业技术院产业技术融合领域研究所仿生组,日本通商产业省工业技术院产业技术融合领域研究所仿生组,日本通商产业省工业技术院产业技术融合领域研究所仿生组,日本通商产业省工业技术院产业技术融合领域研究所仿生组,日本通商产业省工业技术院产业技术融合领域研
关键词
肝细胞分离; 人工肝脏原代培养; 成年猪;
D O I
暂无
中图分类号
R329.2 [人体细胞学];
学科分类号
100107 [人体解剖与组织胚胎学(人体解剖学、组织与胚胎学)];
摘要
目的 开发从屠宰器官进行高活性猪肝细胞规模分离的优化程序。方法 采用部分肝叶逆行灌注、机械及组酶肝消化并经密度梯度离心获取高产量、高纯度肝实质性细胞。结果 部分肝叶经消化可获取 1 39× 10 9肝细胞的平均产量 (9 9× 10 6肝细胞 /克组织 )及 92 5 %的平均细胞存活率。经组合性dispase/胶原酶的消化处理肝细胞的收获量及存活率明显增加。对细胞灌流及分离液进行氧化处理能阻止泡状细胞的发生。分离的猪肝细胞经原代培养其活性及机能保持着与鼠肝细胞一致的水平 ,且随时间的推移而减退。结论 通过我们改良的方法可收获高产量成年猪肝细胞 ,并保持良好的活性与分化机能。因此 ,成年猪肝细胞被证实是人工肝脏辅助支持系统中生物组的一个很有价值的肝细胞来源。
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共 1 条
[1]
Ponceau S: A sensitive method for protein determination in freshly isolated and cultured cells.[J].Nancy Thompson Hayner;James Driscoll;Lisa Ferayorni;Geraldine Spies-Karotkin;Hugo O. Jauregui.Journal of Tissue Culture Methods.1983, 2