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产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及病毒滴度影响因素
被引：18
作者：
张惠中
范清宇
杨安钢
机构：
[1] 第四军医大学唐都医院骨科!陕西西安,第四军医大学唐都医院骨科!陕西西安,第四军医大学基础部分子生物学教研室
来源：
基金：
高等学校骨干教师资助计划;
关键词：
逆转录病毒载体;
包装细胞;
集落形成单位;
D O I：
暂无
中图分类号：
R459.9 [其他疗法];
学科分类号：
100231 [临床病理学];
摘要：
目的 探讨产生重组逆转录病毒包装细胞系建立及其病毒滴度 (以 cfu表示 )的影响因素 .方法 用逆转录病毒载体 p SL XCMV,以磷酸钙共沉淀法转染 PA317包装细胞 ,挑选抗性集落 (PA317/ p SL XCMV)扩大培养后 ,进行 PA317/p SL XCMV细胞接种密度、培养温度 (37℃ ,32℃ )、纯化方法等对其培养上清中重组病毒 cfu影响的比较性研究 .结果 包装细胞的密度是影响 cfu滴度的关键因素 ;降低培养温度需延长培养时间方可提高 cfu滴度 ;对比离心纯化与过滤纯化 ,并未发现两者之间的差异 .结论 该实验结果为应用逆转录病毒载体进行的 ex vivo基因治疗实验研究提供重要参考指标
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