内毒素上调肝细胞表达CD14基因和蛋白的实验研究

目的　观察内毒素血症时肝组织和游离肝细胞中ＣＤ１４基因和ＣＤ１４蛋白的表达。方法　经尾静脉注入脂多糖（ＬＰＳ， Ｅ　ｃｏｌｉ Ｏ１１１．Ｂ４）建立大鼠急性内毒素血症动物模型，并用原位胶原酶灌注法分离肝细胞。用流式细胞仪（ＦＣＭ）测定异硫氢酸荧光素（ＦＩＴＣ）－ＣＤ１４阳性肝细胞数及其荧光强度。同时用逆转录－ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法测定肝组织和肝细胞中ＣＤ１４ｍＲＮＡ和ＣＤ１４蛋白的表达。结果 ＦＣＭ显示：内毒素血症大鼠６ｈ和１２ｈＦＩＴＣ－ＣＤ１４阳性细胞数明显增多，荧光强度也明显增加。ＲＴ－ＰＣＲ显示，肝组织和肝细胞中ＣＤ１４ｍＲＮＡ的表达在３ｈ时明显增强，６ｈ达高峰，２４ｈ恢复正常水平；Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析示肝组织和肝细胞中ＣＤ１４蛋白的表达在６ｈ明显增高，１２ｈ达高峰，２４ｈ仍有一定表达，各时相点间比较有显著差别（Ｐ＜０．０１）。结论　内毒素血症时能明显上调肝细胞ＣＤ１４基因和ＣＤ１４蛋白的表达。