根瘤农杆菌介导的枸杞转化及转化植物的获得

被引:11
作者
王慧中
杜立群
黄发灿
李安生
邵启全
机构
[1] 中国科学院遗传研究所
[2] 中国科学院遗传研究所 北京 浙江省杭州师范学院
[3] 北京 中国科学院植物研究所工程植物实验室
[4] 北京
关键词
枸杞; 根瘤农杆菌; Ti质粒; 再生系统;
D O I
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中图分类号
学科分类号
摘要
本文报道一种重要的中药——枸杞(Lycium barbarum L.)的转化、再生系统的建立。以根瘤农杆菌(Agrobaterium tumefaciens)C58cl(pGV3850::neo1103)感染枸杞的幼茎外植体,在含卡那霉素50μg/ml的诱培养基上选择转化的愈伤组织,在含卡那霉素25μg/ml分化培养基上得到再生小芽,再生小芽中有30%外观形态正常。形态正常的小芽转到生根培养基后可长出根从而得到完整的植株。胭脂碱检测。NPT-Ⅱ活性测定及分子杂交的结果均表明,外源基因已导入枸杞并得以表达。在实验过程中还发现:(1) 经过一定预处理后,形成愈伤组织较快的外植体易被转化。(2) 转化后愈伤组织再生正常植株的频率比未转化的愈伤组织高。
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