鲤鱼sGnRH基因克隆及其在成熟个体的表达分析

被引:9
作者
黎双飞
胡炜
汪亚平
孙永华
陈尚萍
朱作言
机构
[1] 中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室,中国科学院水生生物研究所淡水生态和生物技术国家重点实验室武汉,武汉,武汉,武汉,武汉,武汉
基金
国家高技术研究发展计划(863计划);
关键词
促性腺激素释放激素; 表达分析; 鲤鱼;
D O I
暂无
中图分类号
Q785 [转化及克隆];
学科分类号
071007 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
采用RACE方法 ,从鲤鱼脑组织克隆了两个差异的sGnRH(salmonGnRH ,[Trp7Leu8]GnRH)cDNAs ,即cDNA1和cDNA2 ,其长度分别为 393和 4 78bp。两个cDNAs都包括一个 2 85bp开放阅读框 ,编码的sGnRH前体为 94个氨基酸残基 ,由一个信号肽、sGnRH十肽和一个由蛋白水解位点 (Gly Lys Arg)连接的促性腺激素释放激素相关肽共 3部分组成。用内含子捕获得到相应的两个差异sGnRH基因 ,即sGnRHgene1和 gene2 ,其基本结构都包括 4个外显子和 3个内含子 ,3个内含子的核苷酸相似性分别为 71 1%、76 1%和 88.0 %。鲤鱼sGnRHcD NAs及基因的基本结构和编码特点与已报道的不同形式GnRHcDNAs和GnRH基因相似 ,由此推测所有类型的GnRH可能来自一个共同的祖分子。Southern杂交进一步证实鲤鱼基因组存在两个不同的sGnRH基因座位。相对定量RT PCR检测发现 ,两个sGnRH基因除在精巢的表达存在差异外 ,在脑区、垂体和成熟卵巢共表达。其中两个sGnRH基因在端脑和下丘脑的表达水平明显高于后脑区。根据sGnRHmRNAs在多个脑区、性腺和垂体的共存推测 ,sGnRH可能对鲤鱼下丘脑 垂体 性腺轴的调节有至关重要作用 ,同时可能起神经调节剂或自分泌和旁分泌调节因子的作用
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