锁核酸探针多重荧光PCR快速检测肉制品中4种动物肉掺假的研究

应用锁核酸探针技术建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭4种动物肉掺假的方法。针对动物线粒体基因组的保守序列,设计特异性引物和Taqman-LNA探针,建立同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭源性成分的多重Taqman-LNA荧光PCR方法,用于市售肉制品的检测,同时采用标准方法进行验证。结果显示,建立的多重Taqman-LNA荧光PCR方法可同时检测肉制品中上述动物源性成分,检测限均达到肉含量的0.01%。将样品Ct≤30,且|样品Ct-纯肉Ct|≤7判为肉掺假;将样品Ct≤30,且|样品Ct-纯肉Ct|>7判为肉污染。对200份市售肉制品检测发现,有42份样品掺入标签标示以外肉种,有22份样品存在肉污染,其中2份样品暨掺假又污染。多重方法对肉源性成分的检测结果与现行标准方法符合率达99%。本研究建立的方法可同时检测肉制品中牛、猪、鸡、鸭4种动物源性成分,具有特异、快速、经济、高通量等优点,设定的肉掺假和肉污染判定标准合理,可有效避免肉污染导致的掺假误判。