人TGFβ1cDNA高表达重组质粒的构建

被引:2
作者
赵涵芳
于丽莉
刘军
章有章
机构
[1] 上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室!
关键词
人TGFβ1; 重组质粒; 基因表达;
D O I
暂无
中图分类号
R392.12 [免疫细胞生物学];
学科分类号
摘要
目的为了得到基因工程制备的人重组TGFβ1,构建人TGFβ;cDNA高表达重组质粒。方法从人血小板中提取总RNA,经RT-PCR得到TGFβ;cDNA基因,并克隆到表达质粒pBLMVL2中,构建了在PL启动控制基因表达质粒pBLMVL2-TGFβ;,使其在大肠杆菌中进行温敏诱导表达。结果RT-PCR得到的TGFβcDNA经DNA序列分析与文献报道一致,pBLMVL2-TGFβ1在大肠杆菌中表达产物人重组TGFβ1经还原型SDS-PAGE电泳,呈一条蛋白条带,分子量12.5kd,表达产物约占全菌蛋白20%。结论构建的重组质粒pBLMVL2-TGFβ1能高表达人重组TGFβ1。
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