鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库的构建

被引:21
作者
张义兵
石耀华
桂建芳
不详
机构
[1] 中国科学院水生生物研究所
[2] 中国科学院水生生物研究所 淡水生态与生物技术国家重点实验室
[3] 武汉
[4] 淡水生态与生物技术国家重点实验室
关键词
鱼类; 草鱼出血病病毒; 抗病毒相关基因; 诱导; 抑制性差减杂交;
D O I
暂无
中图分类号
S941 [鱼病学];
学科分类号
0906 ;
摘要
紫外线灭活的草鱼出血病病毒 (GCHV)能诱导鲫囊胚培养细胞 (CAB)产生高滴度的干扰素 ,从而诱导宿主细胞基因表达的改变并处于抗病毒状态。提取灭活病毒诱导未经病毒诱导的CAB细胞mRNA ,利用抑制性差减杂交技术 ,成功构建了鱼类培养细胞抗病毒基因差减cDNA文库。以鲫管家基因α tubulin和 β actin作为差减指标 ,检测差减cDNA文库的差减效率分别高达 2 15和 2 7倍 ,表明经过病毒诱导后的细胞中 ,某些差异表达基因的富集效率也接近 2 15倍。鱼类抗病毒基因差减cDNA文库的建立对快速分离、克隆鱼类抗病毒相关基因和认识鱼类细胞抗病毒免疫的分子机理有重要意义。
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