TRIM59对神经胶质瘤形成的促进作用

目的·揭示TRIM59在神经胶质瘤发生中的作用及分子机制。方法·通过免疫组织化学法分析TRIM59蛋白在临床胶质瘤手术切除样本中的表达;利用Western blotting和定量PCR法分析TRIM59在多个胶质瘤细胞系中的表达;利用shRNA敲低胶质瘤细胞系中TRIM59基因,分析其对胶质瘤细胞增殖、迁移、琼脂糖克隆形成及颅内原位肿瘤形成的影响;通过转录组测序及KEGG PATHWAY软件分析TRIM59调节的信号通路。结果·TRIM59在神经胶质瘤组织中表达水平与肿瘤的临床分级呈正相关。相对于正常星形胶质细胞,胶质瘤细胞系LN229和U87细胞中TRIM59表达较高。用慢病毒介导的shRNA抑制U87和LN229细胞中TRIM59的表达,能显著降低体外细胞增殖、迁移及克隆形成能力。用敲低TRIM59基因的U87细胞注射入裸鼠的右脑室,相较于对照细胞,胶质瘤细胞体积明显缩小。转录组测序及KEGG PATHWAY分析表明,敲低LN229细胞TRIM59基因后共有306个基因下调,其中与PI3K/AKT信号通路相关的基因最多。Western blotting分析发现,LN229和U87细胞敲低TRIM59后,AKT磷酸化水平显著降低,而过表达组成型活化的Myr-AKT可逆转TRIM59敲低对细胞增殖的抑制作用。结论·TRIM59是新发现的胶质瘤促癌基因,其可能通过PI3K/AKT信号通路发挥作用。