PCR技术诊断隐孢子虫病方法的建立及其初步应用

被引:1
作者
李建华
张西臣
尹继刚
杨举
李德昌
机构
[1] 解放军农牧大学寄生虫病教研室
[2] 解放军农牧大学寄生虫病教研室 长春
[3] 长春
[4] 长春
关键词
PCR; 虫病; DNA; 卵囊; 藏卵器;
D O I
暂无
中图分类号
S855.9 [兽医寄生虫病学];
学科分类号
摘要
<正> 本研究应用聚合酶链反应(PCR)建立了一种检测人及牛粪便中隐孢子虫卵囊 DNA 的方法.以蔗糖梯度离心法纯化鼠源 C.muris 卵囊;甘油漂浮-G3耐酸漏斗过滤法纯化牛源 C.muris、牛源 C.parvum 和鼠源C.parvum 卵囊.结果发现甘油漂浮-G3耐酸漏斗过滤法纯化隐孢子虫卵囊具有纯度高、回收率达96%、介质便宜及操作简便等优点.纯化卵囊经液氮冻融后按常规法提取 DNA 作为 PCR 模板.根据 GenBank 中C.muris 和 C.parvum 18SrRNA 基因序列,应用计算机辅助设计合成一对 PCR 引物(上游引物:5′-AAACCCAACTTTGCGGAAGG-3′,下游引物:5′-CCATGCTGGAGTATTCAAGGC-3′).以此引物扩增
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