液相色谱法测定小鼠脑组织中ATP、ADP及AMP含量

被引:18
作者
吴燕川 [1 ]
李尧华 [2 ]
谢胜男 [2 ]
李昕 [2 ]
于顺 [2 ]
何士大 [1 ]
机构
[1] 首都医科大学宣武医院中心实验室神经变性病教育部重点实验室
[2] 首都医科大学宣武医院神经生物学研究室
基金
北京市自然科学基金;
关键词
腺苷酸; 高效液相色谱法; 脑组织; 小鼠;
D O I
暂无
中图分类号
R-332 [医用实验动物学];
学科分类号
100402 [劳动卫生与环境卫生学];
摘要
目的建立小鼠脑组织中腺苷酸含量测定的高效液相色谱(high performance liquid chromatogram,HPLC)-可变波长检测法。方法应用酸沉淀蛋白、Agilent1200高效液相色谱系统、Supelco Discovery C18(150 mm×4.6 mm,5μm)反相色谱柱及相同填充材料的预柱,对小鼠脑组织样品中腺苷酸进行分离分析,波长为254 nm,流动相为30 mmol/L K2HPO4-KH2PO4(含5%甲醇),pH5.85,流速为1.0 mL/min,进样体积为20μL,柱温为30℃。结果腺苷酸ATP、ADP及AMP在10~100 mg/L范围,线性关系良好,线性方程为ATP:A=28.924C+14.144,γ=0.999 90;ADP:A=31.504C-12.608,γ=0.999 92;AMP:A=46.539C-5.255,γ=0.999 95。平均回收率为95.3%~103.2%;日内和日间相对标准差(RSD)分别为1.14%~1.75%、2.45%~3.97%。结论高效液相色谱-可变波长检测法可以简便、准确、有效地测定急性重复低氧小鼠脑组织中ATP、ADP和AMP的含量。
引用
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