艾灸“关元”“三阴交”对去卵巢大鼠骨形态、代谢及骨髓间充质干细胞ERα的影响

目的:观察艾灸"三阴交"和"关元"对去卵巢大鼠骨形态、代谢及骨髓间充质干细胞ERα的影响,探讨艾灸关元、三阴交调控骨代谢的内在机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常组(20只)和卵巢切除组(40只),正常组不予处理,卵巢切除组采用经典去卵巢法建立大鼠骨质疏松模型。卵巢切除术后第13周时,正常组和卵巢切除组各取10只进行模型鉴定。模型鉴定成功后,卵巢切除组随机分为模型组、雌二醇组和艾灸组,每组10只。正常组和模型组予2mL 0.9%氯化钠溶液灌胃,每日1次;雌二醇组予17β-雌二醇100μg/(kg·d)灌胃,每日1次;艾灸组予艾灸"关元""三阴交",每穴15 min,每日1次,均6次为一疗程,疗程间休息1 d,共12个疗程。干预12周后,活体状态下采用双能X线测定全身骨骼的骨密度和骨矿质;处死后,分别采用苏木素-伊红染色法(HE)染色观察股骨骨结构,酶联免疫吸附试验测定血清中雌二醇(E2)、碱性磷酸酶(ALP)的吸光度,荧光实时定量PCR法检测胫骨、股骨髓腔中骨髓间充质干细胞ERαmRNA的表达。结果:与模型组比较,艾灸组及雌二醇组大鼠骨盆、脊柱部位的骨密度增加(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,艾灸组和雌二醇组大鼠肋骨、骨盆、脊柱等部位的骨矿质含量有升高趋势,但差异无统计学意义(均P>0.05);与模型组比较,艾灸组大鼠骨小梁更加粗壮,相互连接较多;与模型组比较,雌二醇组和艾灸组血清中E2的浓度均升高明显(均P<0.01),雌二醇组和艾灸组血清中ALP的浓度降低明显(均P<0.001),雌二醇组和艾灸组骨髓间充质干细胞中ERαmRNA的表达升高(均P<0.001)。结论:艾灸"三阴交"和"关元"可有效增加去卵巢大鼠的骨密度和骨强度,其机制可能与提高血清中E2浓度,降低血清中ALP浓度,上调骨髓间充质干细胞中ERαmRNA的表达有关。