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抗孕酮Fab’-大豆过氧化物酶交联物的制备和鉴定附视频
被引：2
作者：
龚振明
李蓓
陈鲁勇
沈明泉
机构：
[1] 上海交通大学农业与生物学院
[2] 上海交通大学农业与生物学院 上海
[3] 上海
来源：
关键词：
孕酮;
Fab’-SBP;
二级竞争;
酶联免疫测定;
D O I：
暂无
中图分类号：
S852.4 [家畜免疫学];
学科分类号：
090602 ;
摘要：
用硫酸铵沉淀法对兔抗孕酮血清进行粗提后用DEAESepharoseFastFlow对IgG进行层析纯化 ,然后用胃蛋白酶切除Fc片段而制备F(ab’) 2 ,用 β 巯基乙醇还原F(ab’) 2 后得到Fab’ ,再将Fab’与热稳定性较高的大豆过氧化物酶 (SBP)偶联制得抗孕酮Fab’ SBP。将抗孕酮Fab’ SBP用于二级竞争酶联免疫法测定孕酮有以下优点 :(1)减少因Fc片段与固相载体非特异性吸附而引起的高背景干扰 ;(2 )由于Fab’和SBP在很温和的条件下偶联 ,可使偶联产物保持较高的免疫活性和酶活性
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