建立了同时测定四君子丸中党参炔苷、茯苓酸、甘草酸、苍术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ含量的高效液相色谱法。色谱条件为:HIQSILC18V色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以0.5%冰乙酸-甲醇体系为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,采用蒸发光散射检测器检测,进样量为10μL,柱温为25℃,漂移管温度为55℃,喷雾器加热级别为60%,载气为氮气,压力0.2MPa。在上述条件下,党参炔苷、茯苓酸、甘草酸、苍术内酯Ⅲ和白术内酯Ⅰ的质量浓度分别在0.076~1.21,0.048~0.76,0.153~2.45,0.045~0.72和0.098~1.56g/L时,质量浓度的对数值与色谱峰面积的对数值之间的线性关系良好;平均回收率在97.13%~100.25%之间,相对标准偏差在1.23%~2.44%之间。该方法简便、快速、准确,可用于四君子丸的质量控制。