人肿瘤坏死因子受体I死亡域融合蛋白基因的克隆与表达

被引：1

作者：

林丽珠

李昌本

赵寿元

ＤｅＷｉｌｄｅＧ．ＨａｅｇｅｍａｎＧ．ＦｉｅｒｓＷ．

机构：

[1] 复旦大学遗传学研究所遗传工程国家重点实验室

[2] 比利时根特大学分子生物学实验室

来源：

生物化学与生物物理学报 | 1998年 / 06期

关键词：

人肿瘤坏死因子受体I；死亡域；融合基因表达;

D O I：

暂无

中图分类号：

Q78, [];

学科分类号：

071007 ; 0836 ; 090102 ;

摘要：

通过设计４个引物进行重叠（ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇ）ＰＣＲ，由此克隆了人肿瘤坏死因子受体Ｉ死亡域（ｄｅａｔｈｄｏｍａｉｎ）与氯霉素乙酰转移酶（ＣＡＴ）的融合蛋白基因（ＤｄＬｃａｔ）。该融合蛋白基因经测序，证明与设计的序列相同。构建成的重组表达质粒ｐＬＴ１０ＤｄＬｃａｔ转化大肠杆菌后发酵，ＩＰＴＧ诱导２ｈ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定ＤｄＬｃａｔ蛋白质的分子量为３９ｋＤ。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹实验进一步作了鉴定。表达产物大部分为包涵体。ＤｄＬｃａｔ经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱层析后纯度大于９５％。

引用

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