林生山黧豆谷氨酸脱羧酶的分离纯化及部分性质的研究

被引：9

作者：

穆小民

沈黎明

吴显荣

机构：

[1] 中国农业大学生物学院!北京，,中国农业大学生物学院!北京，,中国农业大学生物学院!北京，

来源：

生物化学杂志 | 1997年 / 02期

关键词：

林生山黧豆; 谷氨酸脱羧酶; 分离纯化;

D O I：

10.13865/j.cnki.cjbmb.1997.02.013

中图分类号：

Q946 [植物生物化学];

学科分类号：

071001 ;

摘要：

以林生山黧豆为材料，利用硫酸按分段盐析，丙酮沉淀，DEAE-SepharoseFF离子交换柱层析，SephacrylS300凝胶过滤柱层析及FPLC-MonoQ柱层析技术，以聚酰胺薄膜层析荧光定量法为酶活力检测手段，分离纯化了谷氨酸脱羧酶，达到电泳银染纯．纯化后的林生山黧豆谷氨酸脱羧酶活力达375．09U·mp-1，纯化倍数38．2倍，经SDS-PAGE测定，其亚基分子量为70kD，经梯度PAGE确定，天然分子量为140kD，表明该酶是由两个亚基组成的二聚体．酶学研究表明，纯化的林生山黧豆谷氨酸脱羧酶的最适pH值为5．4，对谷氨酸的Km值为1．62×10-3mol·L-1，酶的最适温度为40℃，酶特异性地使谷氨酸脱羧，不能使天门冬氨酸等其它氨基酸脱羧．

引用

页码：181 / 186

页数：6

共 9 条

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