苹果基因组RAPD反应体系影响因子的优化

被引:12
作者
田义轲
王彩虹
张继澍
戴洪义
顾耘
段方猛
机构
[1] 莱阳农学院园艺系
[2] 西北农林科技大学生命科学学院
[3] 莱阳农学院植保系
[4] 莱阳农学院植保系 山东莱阳
[5] 山东莱阳
关键词
苹果基因组; RAPD; 影响因素;
D O I
暂无
中图分类号
S661.1 [苹果];
学科分类号
090201 ;
摘要
分析了影响苹果基因组RAPD扩增的几种因素,包括模板DNA、Mg2+、dNTPs和引物的浓度、以及Taq酶的用量等,并提出了一个最佳方案,即25μl总反应体系中含DNA模板40~60ng、Mg2+2.0mmol/L、dNTPs0.2mmol/L、引物0.45μmol/L、Taq酶1.2U。本研究的PCR反应程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,37℃退火35s,72℃延伸90s进行40个循环,最后72℃延伸5min。
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