β-葡萄糖苷酶激活苦杏仁苷诱导LoVo细胞凋亡及活性对Bax与bcl-2基因表达和Caspase-3的影响

目的观察苦杏仁苷被β葡萄糖苷酶特异激活后对大肠癌LoVo细胞凋亡的影响。方法分别将不同浓度的苦杏仁苷加β葡萄糖苷酶作用于大肠癌LoVo细胞株24h,通过细胞形态学、DNA凝胶电泳、流式细胞仪观察细胞凋亡变化,RT PCR方法检测细胞bcl2、BaxmR NA表达变化,Caspase3试剂盒检测细胞Caspase3酶活性的变化。结果0.1～1.0mmol/L的苦杏仁苷与250nmol/L的β葡萄糖苷酶作用于细胞24h后,可见到以凋亡为主的形态变化细胞核固缩、染色质凝集及核碎裂、染色质片段化,琼脂糖凝胶电泳见DNA断裂成有规律的特征性梯状条带,流式细胞仪分析显示在G1期细胞前出现亚二倍体峰;RT PCR检测显示BaxmRNA表达升高,而bcl2mRNA表达无变化;Caspase3酶活性呈剂量依赖性增加。结论苦杏仁苷被β葡萄糖苷酶特异性激活后能导致LoVo细胞凋亡,这一过程中,Bax基因表达上调及Caspase3酶活性增加与LoVo细胞凋亡有关。