以全RNA为底物进行逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)是获取外源基因的有效途径(简报)

被引:1
作者
黄秉仁
闻丹忆
蔡良婉
机构
[1] 中国医学科学院基础医学研究所,中国医学科学院基础医学研究所,中国医学科学院基础医学研究所北京,北京,北京
关键词
PCR; 外源基因; 聚合酶链反应; 底物; RNA; RT;
D O I
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中图分类号
学科分类号
摘要
<正> 基因工程研究工作中,目的基因的获得通常需要构建基因组基因文库、cDNA文库而后进行筛选或用化学法人工合成全部所需核苷酸顺序。这些方法或繁琐或昂贵。近年来聚合酶链反应(PCR)成功地应用于基因组特异DNA片段的扩增,而逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)则是将mRNA逆转录(RT)出DNA第一链再进行PCR反应(RT-PCR)以获得外源基因。但在RT-PCR反应中mRNA的分离纯化增加了其降解的可能性且耗时费力,本研究则是以全RNA为底物进行RT-PCR反应,获取了一系列外源基因。
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