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人感染高致病性禽流感病毒H5N1核酸检测方法的建立及应用
被引：13
作者：
温乐英
徐红
蓝雨
赵翔
张晓光
王大燕
姚丽红
董婕
张家淮
郭元吉
舒跃龙
机构：
[1] 中国疾病预防控制中心病毒病所国家流感中心传染病预防控制国家重点实验室
来源：
基金：
国家自然科学基金重大项目;
关键词：
H5N1禽流感病毒;
RT-PCR;
real-timePCR;
实验室检测;
D O I：
暂无
中图分类号：
R450 [];
学科分类号：
摘要：
目的建立人感染高致病性禽流感病毒H5N1的核酸检测方法,用于人感染高致病性禽流感病毒疑似病例临床标本的检测。方法针对甲型流感病毒保守基因M设计RT-PCR和real-timePCR引物检测是否为甲型流感病毒,同时针对H5N1禽流感病毒设计针对H5和N1基因的特异性RT-PCR和real-timePCR引物作亚型检测,建立禽流感H5N1病毒RT-PCR和real-timePCR检测方法。结果本研究建立的RT-PCR和real-timePCR方法可以特异性地检测H5N1病毒,并且与人流感病毒H1、H3没有交叉反应。RT-PCR检测方法灵敏度可到1TCID50,real-timePCR灵敏度可达0·01TCID50。利用上述方法检测人感染高致病性禽流感病毒H5N1疑似病例临床标本,从42例不明原因肺炎病例中检测出阳性标本13例。结论本研究建立的RT-PCR和real-timePCR方法可以用于人感染高致病性禽流感病毒H5N1临床标本的实验室检测。
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