固体制剂中多糖含量测定的样品预处理方法研究

目的:研究中药固体制剂中多糖含量测定的样品预处理方法,消除辅料对多糖测定的干扰。方法:采用硫酸-苯酚法测定多糖含量;用糖化酶水解麦芽糊精,测定酶解最适宜条件下辅料充分水解酶用量及反应时间;用热孵育改变乳糖的构型,并对孵育的温度和时间进行优化;用筛选的方法测定黄芪多糖片剂、枸杞多糖片剂及蛹虫草多糖片剂中多糖的含量。结果:糖化酶不能水解多糖,但可水解麦芽糊精,消除对多糖测定的干扰,最佳反应条件为:酶与底物比例为2∶5、反应时间30 min可将麦芽糊精充分水解;乳糖经60℃孵育30 min后旋光度由4.119±0.095降低为2.629±0.005,在80%乙醇中溶解度提高为孵育前的3.2倍,可消除乳糖对多糖含量测定无干扰。采用酶水解恒温热孵育方法可以准确测定黄芪多糖片剂、枸杞多糖片剂及蛹虫草多糖片剂中多糖的含量,测定结果与加入量无差异(P>0.05)。结论:糖化酶水解法可以排除糊精对多糖测定的干扰,热孵育法可以消除乳糖的干扰。