直接竞争ELISA法快速检测动物源性食品中磺胺嘧啶残留

采用重氮化-偶联法将磺胺嘧啶（SD）与人血清白蛋白（HSA）相连制备了免疫抗原SD-HSA,与卵清白蛋白（OVA）相连制备了包被抗原SD-OVA,用过碘酸钠法将SD-OVA与辣根过氧化物酶（HRP）连接制备了酶标抗原（SD-OVA-HRP）。用SD-HSA免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选和克隆化制备了单克隆抗体,利用单抗建立了直接竞争ELISA方法。该方法具有好的特异性,在1～729 ng/mL浓度范围标准曲线方程y=12.05x+2.253 8,R2=0.995,IC50为41.7ng/mL,在猪肉、鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛奶中的检测限分别为20、20、20、5、5μg/kg。在20μg/kg和100μg/kg水平猪肉、鸡肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋样品中添加,回收率为82.78%104.6%。与高效液相色谱方法比较,二者的阳性符合率为81.3%,阴性符合率为83.3%,总符合率为88.9%;与同类英国RANDOX试剂盒比较,二者符合率为100%。