转基因产品中PAT蛋白的酶联免疫检测(英文)

被引:6
作者
许文涛
黄昆仑
邓爱科
罗云波
机构
[1] 中国农业大学食品科学与营养工程学院
关键词
酶联免疫检测技术; PAT蛋白; 转基因产品检测;
D O I
暂无
中图分类号
S188 [农业生物工程]; S565.4 [油菜籽(芸薹)];
学科分类号
071007 ; 0828 ; 0836 ; 090102 ;
摘要
建立并优化了转基因油菜(Brassicacampestris)中的PAT蛋白酶联免疫检测技术。首先通过Western杂交和酶活性分析鉴定了PAT蛋白的纯度和活性。然后以其为抗原免疫新西兰大白兔制备了PAT蛋白的多克隆抗体,并采用硫铵沉淀法和proteinA-Sepharose4B对其进行了纯化。所得抗体对PAT蛋白的检测限为2×10-5mg/mL,且与植物源的几种结构功能相关蛋白均无交叉反应。然后对植物蛋白进行初步提取,应用酶联免疫检测技术对转基因油菜(MS1/RF1andMS8/RF3)中的PAT蛋白进行了检测,结果表明ELISA能高效地鉴别转基因和非转基因油菜。
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