大鼠脑缺血再灌注后线粒体呼吸链相关基因表达

目的 :研究海马神经元缺血再灌注后线粒体相关基因的表达。方法 :改良Pulsinell四血管阻断模型致大鼠脑缺血 10min再灌注 2 4h后 ,取新鲜海马组织抽提mRNA。逆转录后经液相杂交递减无差异表达序列。以抑制性PCR方式扩增差异表达序列。之后构建cDNA文库 ,测序鉴定阳性克隆。最后应用斑点杂交确认差异表达。结果 :构建cDNA文库后获得的 78个阳性克隆中有 7个克隆经最后的鉴定具有差异表达性。测序提示为细胞色素氧化酶C亚单位和NADH -泛醌氧化酶复合体 4链的表达性片段。结论 :细胞色素氧化酶C亚单位的差异表达从另一个侧面证实了之前提出的再灌注损伤中细胞色素氧化酶C的重要作用。再灌注损伤后NADH -泛醌氧化酶复合体 4链的表达提示原来功能不明的NADH -泛醌氧化酶复合体 β亚基可能在这一病理过程中发挥一定的作用。