过度训练部分通过炎性信号途径诱导肾小管上皮细胞凋亡

目的观察过度训练大鼠肾组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)、核因子κB(NF-κB)的表达及其与肾组织细胞凋亡的关系以及旋覆花素对其的影响,探讨炎性信号途径在其中的作用。方法采用大鼠游泳至力竭建立过度训练模型。将48只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组(CN.n=8)、力竭运动组(Es,n=24)、旋覆花素干预组(IB,n=16)。CN组为安静对照。ES组又根据力竭后恢复时间分为力竭即刻(ESI,n=8)、力竭后6 h(Es 6 h,n=8)和力竭后24 h(ES 24 h,n=8)。IB组于力竭运动前24 h给予旋覆花素25 ml/kg,分3次灌胃后进行力竭运动,分为IB 6 h(n=8)和IB 24 h(n=8)组。TUNEL法检测肾组织细胞凋亡。免疫组织化学法检测。肾组织TNF-α和NF-κB的表达。流式细胞术检测肾组织细胞NF-κB的变化。用图像分析系统测定肾组织凋亡细胞、TNF-α和NF-κB表达的平均吸光度。采用Pearson法分析TNF-α与NF-κB之间的相关性;采用非参数Spearman法分析TNF-α和NF-κB与细胞凋亡之间的相关性。结果TUNEL法显示,过度训练大鼠于力竭后即刻、6 h及24 h肾组织细胞凋亡数呈进行性增多(P<0.01)。免疫组化显示,对照组大鼠肾组织有TNF-α轻微表达,主要分布于肾小管上皮细胞;力竭后即刻(0.136±0.009)、力竭后6 h(0.171±0.011)、力竭后24 h (0.229±0.008)大鼠肾组织TNF-α表达逐渐升高,均显著高于对照组(0.109±0.010)(均P<0.05)。对照组大鼠肾组织NF-κB有轻微表达;力竭后即刻其表达即显著增高(0.129±0.011) (P<0.05);力竭后6 h(0.166±0.009)显著高于对照组(0.095±0.010)及力竭后即刻组(均P<0.05);力竭后24 h(0.218±0.019)则进一步增高,显著高于力竭后即刻和6 h组(均P<0.05)。流式细胞术检测结果也证实了力竭后大鼠肾组织NF-κB有同样变化趋势。过度训练大鼠肾组织TNF-α与NF-κB的表达呈正相关(r=0.955,P<0.01);肾组织TNF-α和NF-κB表达与肾组织细胞凋亡之间均呈正相关(r=0.953,r=0.939,均P<0.01)。用旋覆花素干预后,与同时间点力竭组比较,过度训练引起的肾组织TNF-α(6 h:0.142±0.012,24 h:0.130±0.010)和NF-κB(6 h:0.138±0.010,24 h:0.136±0.011)的过度表达均被显著抑制(均P<0.05)。结论过度训练可导致肾组织炎性反应增强,旋覆花素能部分逆转这种炎性反应。这可能是过度训练引起肾组织细胞凋亡及旋覆花素抗凋亡的分子机制之一。