小鼠卵黄囊间质干细胞向成骨细胞定向分化的实验研究

目的研究卵黄囊间质干细胞的成骨潜能。方法用０．１％的Ⅰ型胶原酶消化获得妊娠第８．５天的小鼠卵黄囊细胞；取贴壁细胞培养，并于接近融合时进行传代培养。对细胞进行形态学观察、碱性磷酸酶（ａｌｋａｌｉｎｅ　ｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，ＡＫＰ）及Ⅰ、Ⅲ型胶原检测，传代４次后进行成骨诱导，每天观察细胞形态，并于培养７ｄ后测定ＡＫＰ、Ⅰ、Ⅲ型胶原及骨形态发生蛋白－２（ｂｏｎｅ　ｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｐｒｏｔｅｉｎ－２，ＢＭＰ　－２）的表达，培养８周后进行矿化检测。结果体外可获得纯化的卵黄囊间质干细胞，细胞大小形态均一，呈梭形，ＡＫＰ染色弱阳性，Ⅰ、Ⅲ型胶原阳性。在体外可诱导卵黄囊间质干细胞定向分化为多形性成骨样细胞，细胞由梭形向星形转化，并形成胞浆突起，相互连接成网状，细胞ＡＫＰ染色阳性，Ⅰ型胶原阳性，Ⅲ型胶原阴性，ＢＭＰ　－２强阳性，８周后矿化区经Ｖｏｎ　Ｋｏｓｓａ　＇ｓ染色呈阳性反应，符合成骨细胞的生物学特征。结论经体外纯化的卵黄囊间质干细胞可诱导向成骨细胞定向分化。