骨髓间充质干细胞在激光损伤大鼠视网膜下分化的观察

被引:10
作者
张杰
单清
马萍
姜严明
陈鹏
温静霞
周游
钱焕文
裴雪涛
机构
[1] 军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院放射医学研究所,军事医学科学院输血研究所北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京,北京
关键词
干细胞; 视网膜; 激光; 荧光抗体技术;
D O I
暂无
中图分类号
R774.1 [视网膜疾病];
学科分类号
摘要
目的 鉴定骨髓间充质干细胞 (MSC)在体外不诱导的条件下移植于掺钕钇铝石榴石(Nd :YAG)激光损伤大鼠视网膜后的定位以及蛋白表达情况。方法 体外培养大鼠MSCs ,用荧光染料 4′ ,6 二脒 2 苯基吲哚 (DAPI)标记MSCs,视网膜下移植后分别于 10、2 0、35和 5 0d处死动物 ,做DAPI荧光观察 ,并在阳性的连续切片上作神经元核 (NeuN) ,神经元特异性烯醇化酶 (NSE) ,胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)和角蛋白 (CK)免疫组化染色及HE染色。分别于损伤前及损伤后即刻、1~ 7周检测损伤移植组、损伤组和损伤注射生理盐水组的视网膜电图 (ERG)b波分析。结果 培养的MSC集落生长迅速 ,均一性好 ;DAPI染色观察表明 ,10d时移植细胞多集中于移植部位周围 ,但分布散乱 ;2 0d时可见阳性细胞分布范围扩大 ,分布于视网膜视锥、视干细胞层、双极细胞层及节细胞层 ;到35d阳性细胞范围进一步扩大 ,且细胞向损伤部位迁移 ;5 0d观察损伤范围与 35d相比扩大不明显。免疫组织化学染色发现阳性区域的细胞在NeuN、NSE、GFAP和CK的表达有不均一性。检测到的阳性区域视网膜未见到玫瑰花结样结构 ,但某些区域的细胞排列不整齐 ,在某些部位有细胞层增生。HE染色表明移植组损伤的恢复好于损伤对照组 ,ERGb波检测表明 5周后损伤移植组的b波水平高于
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