香蕉果实SMART cDNA文库的构建及利用PCR方法筛选香蕉Actin2基因

被引:15
作者
徐碧玉
苏伟
张建斌
刘菊华
金志强
机构
[1] 中国热带农业科学院生物技术研究所热带作物生物技术国家重点实验室
关键词
香蕉; 果实; SMARTcDNA文库; 96孔板PCR; Actin2基因;
D O I
暂无
中图分类号
S668.1 [香蕉];
学科分类号
摘要
利用SMART(switching mechanismat5’end of RNA transcript)技术,提取果实少量总RNA,经15-25轮LD-PCR扩增获得全长ds-cDNA,构建了海南主栽的食用香蕉巴西蕉(Musa AAA Group Cavendish)果实的cDNA文库。所构建的文库容量为5×106Pfuml-1,重组率93%。利用此cDNA文库,采用96孔板PCR法筛选香蕉Actin2基因,测序结果显示,序列全长1723bp,编码区长1134bp,编码378个氨基酸,与蝴蝶兰Actin2基因序列同源率达83%,已递交GenBank,接受号692696。
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页数:6
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