人胚胎脐血间质干细胞生物学特性研究

目的 :研究人中期胚胎脐血间质干细胞生物学特性 ,探讨其在自体宫内基因转移 /治疗 (IUGT)领域的应用前景。方法 :采用L -DMEM完全培养液培养中期胚胎脐血间质干细胞 (MSC) ;流式细胞仪技术检测细胞表面标记 ;地塞米松 /胰岛素等作为脂肪细胞诱导液 ,β -甘油磷酸钠 /抗坏血酸等作为成骨细胞诱导液分别诱导细胞分化 ;将携带有绿色荧光蛋白的重组腺病毒转染MSC ,荧光显微镜下检测MSC表达转基因特性 ;F344新生大鼠肝内注射MSC ,免疫荧光检测 6周后不同组织器官中人MSC存在 ;非肥胖型糖尿病 /重症联合免疫缺陷性小鼠 (NOD/SCID)皮下注射MSC ,病理切片检测第 30d细胞体内成瘤性。结果 :3mL人中期胚胎脐血可以分离、培养出MSC ,细胞均一地表达CD2 9、CD4 4、CD5 9、CD10 5、CD16 6 ,不表达CD34、CD4 5、CD80、CD86、CD4 2a、HLA -DR分子 ,体外培养中具有成脂、成骨能力 ;细胞表达转基因产物绿色荧光蛋白阳性率高达 5 6 32 %± 3 2 8% ;在新生大鼠体内 ,人中期胚胎脐血来源的MSC能向多个不同组织器官迁移 ,在NOD/SCID小鼠内不具有成瘤性。结论 :人中期胚胎脐血MSC适合中、晚期胚胎自体IUGT靶细胞。