产植酸酶的黑曲霉菌株筛选及其植酸酶基因克隆

从土壤中筛选到产植酸酶的黑曲霉菌株Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ９６３，对其所产植酸酶的生理生化性质研究表明其具有适合于在饲料中使用的优良性质。它的酶活性最适温度为５５℃，最适ｐＨ值分别为ｐＨ１．８和５．７，并且在ｐＨ１．８－５．７的范围内，植酸酶均能维持较高的酶活性。摇瓶发酵实验表明，植酸酶的表达量为１６５Ｕ／ｍＬ发酵液。通过ＰＣＲ的方法克隆了植酸酶基因扯ｐｈｙＡ２，ＤＮＡ全序列分析表明其结构基因全长１５０６个核苷酸（编码４６７个氨基酸），５’端有一编码１９个氨基酸的信号肽序列，其中包含一段长１０２个核苷酸的内含子。此序列与曾报道的源于Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒｖａｒ．ａｗａｍｏｒｉ的植酸酶基因ｐｈｙＡ有一定的差异，其ＤＮＡ序列同源性为９１．８％，所编码的蛋日同源性为９１．６％，相应的酶学性质也有所不同。